标题

VACM-1 / Cul5蛋白激酶的磷酸化调节其Neddylation和抗增殖效果

文档类型

文章

出版日期

2-12-2010

出版来源

生物化学杂志

卷号

285年

问题数量

7

第一页

4883年

最后一页

4895年

出版商

美国生物化学和分子生物学学会

石头

0021 - 9258

文摘

VACM-1 / cul5基因的表达在内皮和癌症细胞系体外抑制细胞增殖和减少MAPK的磷酸化。VACM-1蛋白质序列的结构分析发现共识网站特定的磷酸化蛋白激酶A和C (PKA和PKC)和Nedd8蛋白质修改网站。突变在VACM-1 PKA-specific网站/ Cul5 ((S730A) VACM-1)序列导致细胞增长,出现Nedd8-modified VACM-1 / Cul5。本研究的目的是检查如果PKA-dependent磷酸化VACM-1 / Cul5控制neddylation地位,PKC磷酸化,并最终成长。我们的结果表明,体外转染大鼠肾上腺髓内皮细胞anti-VACM-1-specific小干扰RNA寡核苷酸增加内源性VACM-1蛋白质浓度和减少细胞生长。免疫印迹分析细胞溶解产物免疫沉淀反应和抗体针对PKA-specific磷酸化位点和探测anti-VACM-1-specific抗体表明PKA-dependent VACM-1蛋白质的磷酸化是减少细胞转染(S730A)相比VACM-1cDNA cytomegalovirus-transfected细胞。这种变化与修改Nedd8 VACM-1蛋白质的增加。感应的PKA活性forskolin Nedd8 VACM-1protein的修改。最后,鼠肾上腺髓内皮细胞转染(S730A) VACM-1 / cul5 cDNA,接受佛波醇12-myristate 13-acetate(10和100海里)诱导PKC活性明显高于控制细胞增长。这些结果表明VACM-1 / Cul5的抗增殖效果取决于其转译后的修改,将有助于设计新的抗癌治疗目标Nedd8通路。

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